GAPDH(EC1.2.1.12)催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途径的关键酶,与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关,在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。本试剂盒提供了一种简单的检测方法,用于检测生物样本中GAPDH活性。其原理是3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、NAD和无机磷,通过测定无机磷增加速率来测定GAPDH活性。
酶标仪或分光光度计(能测660nm处的吸光度)及恒温箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
制冰机、低温离心机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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可能的原因有:
1.仪器校准不当。
2.检测波长设置错误。
3.反应孔中有气泡或杂质。
可能的原因有:
1.反应温度过高或过低。
2.试剂浓度不合适。
3.样本中目标物质浓度异常。
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