
淀粉酶负责水解淀粉,主要包括α-淀粉酶(α-AL)和β-淀粉酶(β-AL,EC 3.2.1.2)。β-淀粉酶从淀粉的非还原端切开α-1,4糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。本试剂盒提供了一种简单的比色法来检测生物样本中β-淀粉酶活性。其原理是淀粉酶催化淀粉水解生成还原糖,还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质,在540nm有吸收峰;通过测定540nm吸光度增加速率,计算淀粉酶活性。α-淀粉酶耐热,但是β-淀粉酶在70℃下15 min可钝化。因此粗酶液经过70℃钝化15 min,就只有α-淀粉酶能够催化淀粉水解。用不钝化的粗酶液测出总淀粉酶活性,减去α-淀粉酶就可得到β-淀粉酶活性。



酶标仪或可见光分光光度计(能测540nm处的吸光度)
水浴锅、离心机
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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可能的原因有:
1.仪器校准不当。
2.检测波长设置错误。
3.反应孔中有气泡或杂质。
可能的原因有:
1.加样误差或漏加试剂。
2.样本中目标物质浓度过高、样本未充分稀释。
3.反应时间过长或温度过高。
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