2× Universal U Probe Master Mix
货号:PMK0836MU
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价格:
200.00
规格:
1ml
5*1mL
货期:
探针法进行qPCR的2×试剂,主要成分包括化学修饰的Hot Start Taq DNA聚合酶、Heat-labile UDG酶和针对qPCR优化的适Buffer.包含UDG防污染体系。
Details
产品详情
  • 产品简介

    2×Universal U Probe Master Mix是使用探针法进行qPCR的2×试剂,主要成分包括化学修饰的Hot Start Taq DNA聚合酶、Heat-labile UDG酶和针对qPCR优化的适Buffer。本产品使用dUTP完全替代dTTP,dUTP与Heat-labile UDG组成防污染体系、可有效消除扩增产物污染导致的假阳性结果。本品可在宽广的定量区域内获得良好的标准曲线,结果重复性好、可信度高。

  • 操作步骤

    1. 配制检测试剂

    试剂

    体积

    终浓度

    2×Universal U Probe Master Mix

    10ul

    1x

    Forward Primer (10μM)

    0.4ul

    200mM*

    Reverse Primer (10μM)

    0.4ul

    200mM*

    TaqMan Probe (10μM)

    0.2ul

    100mM*

    模板 DNA

    As required**

    /

    DNase-free Water

    As required

    /

    Total Volume

    Up to 20μl

    /

    *通常每条引物终浓度为0.2μM,也可以根据情况在100-400nM间进行调整;每条探针浓度根据具体情况在50-200nM间调整。

    **微量体积加样时误差大,建议模板稀释后再加入反应体系中,这样可以有效提高实验的重复性。。

    2. 反应程序设置

    步骤

    温度

    时间

    循环数

    消化污染

    37

    2min

    1

    预变性/酶激活*

    95

    5min

    1

    变性

    95

    15sec

    40

    退火/延伸**

    60

    40sec

    * Hot Start Taq DNA聚合酶激活需要95℃ 5min;

    **延伸时间请根据您使用的 Real Time qPCR仪数据采集短时间限制以及PCR产物长度自行调整,如ABI7500至少34sec。


  • 注意事项

    1.请于使用前确保产品完全解冻,彻底混匀后短暂离心,置于冰上备用。

    2.为避免样品间交叉污染和气溶胶污染,推荐在超净台或生物安全柜中进行反应体系的配制,并使用带滤芯的吸头。

    3.多次反复冻融会影响产品的性能。

    4.该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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Product Q&A FAQ
产品问答FAQ
  • Q-PCR实验中非特异性扩增

    解决方案:优化引物设计,提高退火温度。或使用探针法(如TaqMan)提高特异性。


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